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synvolux:SAINT試劑常見問題

更新時間:2025-03-28      點擊次數(shù):147

SAINT 試劑的儲存

我們所有的 SAINT 試劑均作為即用型轉(zhuǎn)染試劑在室溫下運輸。到達后,應(yīng)儲存在 4-7°C 下(不要冷凍)。穩(wěn)定性研究表明,SAINT 試劑在開封后至少可穩(wěn)定一年。


我將 SAINT 試劑存放在冰箱中。我還能使用它嗎?

是的!解凍后,SAINT 試劑可能會出現(xiàn)渾濁和更粘稠。使用前,請確保渦旋充分以獲得均勻的分散,或者更好的是,聲音達到透明度?;旌衔锊?/span>*全再溶解會導(dǎo)致工作濃度降低。



我可以在有血清的情況下使用 SAINT 嗎?

是的!在血清存在的情況下,SAINT 轉(zhuǎn)染不會受到抑制。然而,由于 siRNA 極易被血清中存在的 RNA 酶降解,因此可以使用使用 SAINT-sRNA 的替代無血清 siRNA 轉(zhuǎn)染方案。


抗生素會干擾我的轉(zhuǎn)染嗎?

不!抗生素對轉(zhuǎn)染效率沒有影響。


哪些參數(shù)會影響轉(zhuǎn)染結(jié)果?

通常,以下參數(shù)會影響轉(zhuǎn)染結(jié)果:

  • DNA、RNA、寡核苷酸或蛋白質(zhì)的純度和濃度

  • 載體序列(啟動子、poly(A)-tail、密碼子使用等)

  • 添加的 SAINT/DNA 復(fù)合物量

  • 靶細胞(細胞類型、細胞周期、傳代數(shù)等)

  • 蛋白質(zhì)表達(時間依賴性表達水平、表達蛋白質(zhì)的毒性等)

與大多數(shù)其他轉(zhuǎn)染試劑和遞送系統(tǒng)一樣,使用高度純化的 DNA、RNA 或蛋白質(zhì)/肽可獲得最佳結(jié)果。

細胞的“轉(zhuǎn)染性"變化很大。例如,非分裂和非貼壁細胞通常難以轉(zhuǎn)染,而其他細胞類型可能很容易轉(zhuǎn)染,轉(zhuǎn)染效率在 80% 到 100% 之間。此外,某些轉(zhuǎn)染試劑可能比其他試劑對某些細胞效果更好,而某些試劑可能對特定細胞類型有毒。因此,我們建議花一些時間使用報告基因構(gòu)建體(如 GFP)優(yōu)化特定細胞類型的轉(zhuǎn)染條件。


為什么我使用雙倍量的 SAINT 時,我的轉(zhuǎn)染效率沒有翻倍?

SAINT-DNA/sRNA/mRNA 中的陽離子組分與帶負電荷的 DNA/siRNA/mRNA 之間的電荷比對于高效轉(zhuǎn)染非常重要。作為起點,我們建議使用 1:20 比例的 DNA/RNA:SAINT 試劑 (w:v)(例如,對于 12 孔規(guī)格,0.5 ug DNA:10 ul SAINT-DNA)。為了在您的實驗中獲得最佳轉(zhuǎn)染結(jié)果,值得優(yōu)化 DNA/RNA 劑量(例如,對于 12 孔規(guī)格,0.25 ug – 1 ug DNA)和 DNA/RNA:SAINT 試劑比例(例如,對于 12 孔規(guī)格,1:10 – 1:40)。


我應(yīng)該使用哪種 SAINT 試劑進行 DNA、RNA 和/或蛋白質(zhì)的共轉(zhuǎn)染?

我們的 SAINT 試劑針對 DNA (SAINT-DNA)、siRNA (SAINT-sRNA)、mRNA (SAINT-mRNA) 和蛋白質(zhì) (SAINT-protein) 的轉(zhuǎn)染進行了優(yōu)化,但它們都可以在一定程度上遞送其他分子。根據(jù)您的實驗要求,您可以將一種 SAINT 試劑用于兩個不同的分子,或者每個分子使用特定的 SAINT 試劑。


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